日本老化制御研究所酸化ストレスマーカー：酸化LDL測定キット

Rev.080926

酸化LDL測定キット
Human oxidized LDL (ox-LDL) ELISA kit.

（本製品は研究用試薬です。）

【代表的な血中脂質過酸化マーカー】

LDL（low density lipoprotein）は血液中においてコレステロール輸送を担っています。生体内において過剰なフリーラジカルが発生するとLDLに含まれる脂質が酸化され、酸化LDLが形成されます。通常、LDLはLDL受容体を通じて肝臓に取り込まれますが、酸化したLDLは、LDL受容体ではなく、スカベンジャー受容体を通してマクロファージに取り込まれるようになります。 LDLを多量に取り込んだマクロファージは泡沫化し、血管内皮細胞障害、アテローム性動脈硬化病変を引き起こすと考えられています。
本キットは、ヒト血清/血漿サンプルを対象に酸化LDLを測定するサンドイッチELISAキットです。

【製品仕様】

● 測定対象：	ヒト血清/血漿中の酸化LDL
● 測定原理：	サンドイッチELISA法
● 測定レンジ：	25～400 ng/mL
● 所要時間：	約5.5時間
● サンプル所要量：	10μL
● テスト数：	96 wells（N=2のとき42サンプル）
● 必要な器具：	マイクロプレートリーダー（測定波長450nm）、8チャンネルピペット、マイクロピペット（10～1000μL用）、遠心機（3000 x G）、マイクロプレート用振とう機
● 保存条件：	冷蔵（2～8℃）

【キットの構成】

1）マイクロプレート：	（8 wells *12本分割式）	そのまま使用します
2）スタンダード：	5レベル * 4本（凍結乾燥品）	蒸留水500μL/バイアルにて溶解します
3）コントロール：	4本（凍結乾燥品）	蒸留水500μL/バイアルにて溶解します
4）洗浄液（x10）：	100 mL * 2本	蒸留水にて10倍希釈して使用します
5）コンジュゲート試薬：	HRP標識-抗ox-LDL抗体（150μL）	100倍容量の希釈済み洗浄液にて希釈します
6）サンプル希釈液：	50 mL * 1本	そのまま使用します
7）TMB試薬：	TMB水溶液（15 mL）	そのまま使用します
8）反応停止液：	7 mL * 1本	そのまま使用します

【測定手順】

Step 1）	キットを室温（18～26℃）に戻します。マイクロプレートは使用する分だけ取り出し、残りは袋に入れておきます。
Step 2）	マイクロプレートに洗浄液を250μL/ウェル分注、洗浄します。
Step 3）	上記洗浄操作を5回繰り返し、最後にペーパータオルに叩きつけて水をよく切ります。
Step 4）	マイクロプレートにサンプル/スタンダード/コントロールを100μL分注します。
Step 5）	プレートをしっかりシールして、室温にて4時間振とうします。
Step 6）	反応液を捨て、洗浄液 250μL/wellにて5回洗浄します。
Step 7）	希釈済みのコンジュゲート試薬を100μL/well分注します。
Step 8）	プレートをしっかりシールして、室温にて1時間振とうします。
Step 9）	反応液を捨て、洗浄液 250μL/wellにて5回洗浄します。
Step 10）	TMB試薬を100μL/wel分注し、室温暗所にて15～25分インキュベートします。
Step 11）	反応停止液を50μL/well分注し、450nmにおける吸光度を測定します（吸光度が高い場合は405nmでも可）。

品名	商品コード	測定波長	希望小売価格
ヒト酸化LDL測定キット	KLD-020D	450 nm	99,750円（税抜 95,000円）

【製造元】：Immundiagnostik AG, Germany

日本老化制御研究所 Japan Institute for the Control of Aging (JaICA), Nikken SEIL Co., Ltd.