LPO測定キット：酸化ストレスマーカー【日本老化制御研究所】

Rev.170627

脂質酸化損傷マーカー Biomarkers for lipid oxidation.

LPO測定キット（HbMb法） Lipid Peroxide (LPO) assay kit.

（本製品は研究用試薬です）

【過酸化脂質の歴史的測定法】

多価不飽和脂肪酸は酸化を受けやすく、酸素と反応してヒドロペルオキシド基（-OOH）を形成します。 LPO（Lipid hydroperoxide）とは、ヒドロペルオキシド基を有する脂質過酸化物の総称です。
脂質ヒドロペルオキシドは自動酸化反応により大量に生成されるほか、アルコキシラジカル（LO・）やMDAなどのアルデヒドに分解され、細胞障害を引き起こすと考えられています。本キットは、血清、血漿、組織ホモジネート中のLPOを比色法により検出します。

【測定原理】

脂質ヒドロペルオキシド（LOOH）はヘモグロビン存在下でアルコキシラジカル（LO・）に変換され、発色試薬に含まれるメチレンブルー誘導体がアルコキシラジカルと反応してメチレンブルーを生成します。本法は、八木別法とも呼ばれ過酸化脂質の簡便な測定法として広く用いられていました。

【製品仕様】

測定対象：	血清/血漿中の過酸化脂質（LPO）濃度　※新鮮検体を推奨。検体保存期間は2週間以内。
測定原理：	比色法（ヘモグロビン-メチレンブルー法／HbMb法／八木別法）
測定レンジ：	2～300 nmol/mL
所要時間：	約20分
サンプル所要量：	100μL／キュベット（反応液量3mLの場合）
テスト数：	50テスト（反応液量3mLの場合）
必要な器具：	マイクロプレートリーダーまたは分光光度計（測定波長675nm）、ヒートブロック又はウォーターバス（30℃）、ピペット
保存条件：	冷蔵（2～8℃）

【キットの構成】

1）試薬１：	酵素試薬（55 mL）	そのまま使用します。
2）試薬２Ａ：	MCDP試薬	試薬２Ｂを全量加えて溶解します。溶解後は遮光。
3）試薬２Ｂ	ヘモグロビン溶液（110 mL）	そのまま使用します。
4）キャリブレーター：	クミンヒドロペルオキシド溶液（50 nmol/L・10 mL）	そのまま使用します。

※操作方法等は予告なく改訂される場合があります。ご使用前に商品同梱の使用説明書を必ずご確認ください。

【測定手順】

Step 1）	キュベットにサンプルまたはキャリブレーターを0.1mLL分注します。
Step 2）	キュベットに試薬1を1mL添加、混合し、30°Cにて2～5分静置します。
Step 3）	キュベットに試薬2を2mL添加、混合し、30°Cにて10分静置します。
Step 4）	675nmにおける吸光度を測定、LPO濃度を算出します。試薬2の添加から測光までの時間が、キャリブレーター及び全サンプルで一定になるようにしてください。

【参考文献】

1)	Ohishi N, Ohkawa H, Miike A, Tatano T, Yagi K: A new assay method for lipid peroxides using a methylene blue derivative. Biochem Int 10(2):205-211(1985)
2)	Tateishi T, Yoshimine N, Kuzuya F:Serum lipid peroxide assayed by a new colorimetric method. Exp Gerontol 22(2),p103-111(1987).
3)	Pervaiz S, Harriman A, Gulliya KS: Protein damage by photoproducts of merocyanine 540. Free Radic Biol Med 12(5),p389-396(1992)
4)	Supnet MC, David-Cu R, Walther FJ: Plasma xanthine oxidase activity and lipid hydroperoxide levels in preterm infants. Pediatr Res 36(3),p283-287(1994)
5)	Wang MY, Liehr JG: Identification of fatty acid hydroperoxide cofactors in the cytochrome P450-mediated oxidation of estrogens to quinone metabolites. Role and balance of lipid peroxides during estrogen-induced carcinogenesis. J Biol Chem 269(1),p284-291(1994)

品名	商品コード	測定波長	価格（税込）
LPO測定キット（HbMb法）	KLP-004K	675nm	－

【製造元】：Kamiya Biomedical Company, USA

使用説明書(PDF)

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特に操作方法につきましては、ご使用前に商品同梱の使用説明書を必ずご確認ください。

【ご注意】

弊社の提供する試薬、受託分析サービス等は全て研究用です。研究以外の用途（臨床検査/診断/医療行為等）には使用できません。

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LPO（Lipid Peroxide/ HbMb法）測定キット（脂質過酸化/酸化ストレスマーカー）:日本老化制御研究所