日本老化制御研究所酸化ストレスマーカー：GST-π測定用 ELISAキット

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Rev.071113

（本製品は研究用試薬です。）

【グルタチオンSトランスフェラーゼπ：GST-π】

GSTとは発ガン性物質等の親電子性化合物とグルタチオンのカップリング反応を触媒する酵素であり、構造、生理活性の異なる5種類のサブグループより構成されています。GSTサブグループの中でもGST-πは赤血球、白血球において最も多く存在し、肝臓を除く殆どの臓器で検出されています。GST-πは等電点4.7の46kDaの蛋白質からなる2量体で、全ての新生組織（胎児および悪性新生物）中、および術後の増悪症例において血清中に高レベルに検出されます。また、いくつかの血液疾患（溶血性貧血や白血病）においても血清GST-πレベルが高値を示すことが知られています。

近年、細胞内GSTが酸化ストレスに応答して核内に移行すること、GSTの核内移行を阻害すると酸化ストレスによるアポトーシスが増加することが報告され、細胞内レドックス制御に重要な役割を果たしていることが示唆されています。
本キットは抗ヒトGST-π抗体を使ったサンドイッチELISA法により、GST-πを測定します。

【製品仕様】

● 測定対象：	ヒト血清/血漿または組織抽出液
● 測定レンジ：	9.4～600ng/mL
● 所要時間：	一晩+約6時間
● サンプル所要量：	25μL
● テスト数：	96テスト
● 必要な器具：	マイクロプレートリーダー（測定波長450nm）、8チャンネルマイクロピペット（50～250μL）、マイクロプレートシェーカー、マイクロピペット（50～100μL用）、遠心機（3000G）、1.5mLサンプルチューブ、ボルテックスミキサー、蒸留水
● 保存条件：	冷蔵（2～10℃ ・凍結不可）

【参考文献】

1)	Quantitation of glutathione transferase-pi in the urine by radioimmunoassay. Nephron.66(2):162-169(1994) Sundberg AG, Appelkvist EL, Backman L, Dallner G.
2)	Urinary pi-class glutathione transferase as an indicator of tubular damage in the human kidney. Nephron. 67(3):308-316(1994) Sundberg AG, Appelkvist EL, Backman L, Dallner G.

【キットの構成】

1.	マイクロプレート	1枚（96穴）
2.	0倍濃縮洗浄液：蒸留水にて10倍希釈して使用します。	100mL×1本
3.	アッセイバッファー：そのまま使用します。	約11mL×1本
4.	1次抗体試薬（抗ヒトGST-πポリクロナル抗体）：凍結乾燥品	約12mL用×1本
5.	POD標識-2次抗体：そのまま使用します。	約11mL×1本
6.	標準物質：凍結乾燥品。5レベル。	2×5本
7.	コントロール検体：凍結乾燥品。	2本
8.	TMB発色液：そのまま使用します。	約15mL×1本
9.	反応停止液：そのまま使用します。	約7mL×1本

【キットの構成】

1.	サンプルチューブに標準物質/コントロール検体/サンプルを25μL分注し、アッセイバッファー 25μL、１次抗体試薬 200μLを添加し、2～8℃にて16時間インキュベートします。
2.	マイクロプレートを、250μL/wellの洗浄液で5回洗浄します。
3.	サンプルチューブをよく攪拌し、反応液100μLをウェルに分注します（N=2）。
4.	室温にて4時間振とうします。
5.	反応液を捨て、洗浄液250μL/wellにて5回洗浄します。
6.	POD標識-2次抗体試薬を100μL/well分注し、45分間振とうします。
7.	反応液を捨て、洗浄液250μL/wellにて5回洗浄します。
8.	発色液を100μL/well分注し、室温にて10～20分インキュベートします。
9.	反応停止液を50μL/well分注し、450nmにおける吸光度を測定します（バックグラウンド：620nm）
	（典型的な検量線）吸光度が高すぎる場合には、405nmで測定することも可能です。近似曲線にはスプライン関数または4パラメーター関数が適しています。

品名	商品コード	測定レンジ	所要時間	希望小売価格
GST-π測定用ELISA	KGT-600D	9.4～600 ng/mL	一晩+約6時間	94,500円（税抜 90,000円）

【製造元】：Immundiagnostik AG, Germany

使用説明書（英文）

学術情報

【ご注意】

弊社の提供する試薬、受託分析サービス等は全て研究用です。研究以外の用途（臨床検査/診断/医療行為等）には使用できません。

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日本老化制御研究所 Japan Institute for the Control of Aging (JaICA), Nikken SEIL Co., Ltd.